很多人在做檢測(cè)的時(shí)分，都不太在意ELISA試劑盒中的說明書上的檢測(cè)過程，覺得自己都知道，都懂的。但就是由于這種心態(tài)，所以形成有時(shí)分的檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)失誤。生物檢測(cè)原本就是個(gè)很嚴(yán)格并且嚴(yán)謹(jǐn)?shù)氖虑椋愕囊粋€(gè)小的疏忽或許就會(huì)形成意想不到的錯(cuò)誤。
正確的運(yùn)用ELISA試劑盒的過程：
1.在運(yùn)用之前要將試劑充沛的混合均勻，可是要注意在搖晃的時(shí)分不要產(chǎn)生過多的泡沫，從而形成有太多的空氣進(jìn)入試劑中，產(chǎn)生測(cè)試差錯(cuò)。
2.根據(jù)要檢測(cè)樣品的數(shù)量來確定的板條數(shù)。每個(gè)比對(duì)的樣品和空白孔是做復(fù)孔，而樣品的數(shù)量就可以自己視情況而定，不過能用復(fù)孔的仍是用復(fù)孔。將標(biāo)本液體1:1稀釋后倒入50微升的反應(yīng)孔中。
3.在反應(yīng)孔中在參加50微升的待測(cè)樣品，然后馬上參加50微升的生物素標(biāo)記抗體，蓋上模板，輕輕搖晃使其混合均勻后，ELISA試劑盒在37攝氏度的恒溫下等候1小時(shí)。
4.將孔內(nèi)液體甩去，加滿洗刷液，震動(dòng)約30秒后，在甩去洗刷的液體，用紙將水吸干。這姿態(tài)重復(fù)三次。再在沒空參加80微升的親和鏈酶素-HRP，同上混合均勻后，在37攝氏度的恒溫環(huán)境下等候半小時(shí)。
5.同過程四的洗刷辦法。洗刷潔凈后，在沒空中參加底物A,B各50微升，小心混合均勻，避免光照在37攝氏度下等候10分鐘。
6.取出酶標(biāo)板，敏捷參加停止液50微升，測(cè)定結(jié)果。在450納米的波長(zhǎng)處檢測(cè)各個(gè)孔的OD值。
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